验证申请表

确认和验证方案审批表

目录

1.基本信息

2.目的

3.适用范围

4.概观

5.验证方法和内容

6.具体方法和实验结果

7.建议、结果分析和验证总结

8.沙布茨葡萄糖液体培养基的制备及灭菌验证报告

1.基本信息

测试名称：沙布茨葡萄糖液体培养基

批号：XX

规格：250克/瓶

生产单位：XX公司

验证依据：《中国药典》，2015版，四大原则，1105 《微生物计数法》，1106“控制

细菌学检验方法”，《培养基配制操作规程》

2.目的

验证沙布茨葡萄糖液体培养基的配制和灭菌方法，确认是否适合该培养基的配制和灭菌，为质控试验提供优质培养基，制定培养基配制和灭菌的操作方法，为培养基配制和灭菌人员提供正确的操作方法，使培养基的配制和灭菌规范化、程序化。

3.适用范围

本方案适用于舍费尔氏葡萄糖液体培养基的制备和灭菌方法的验证。

4.概观

培养基是微生物检验的基础，直接影响微生物检验的结果。合适的培养基制备方法、保存条件和质量控制检测是提供高质量培养基的保证。

使用市售脱水合成培养基配制培养基时，应严格按照培养基生产厂家提供的质量/体积、pH、配制条件、灭菌条件、操作步骤等说明书进行配制。如果培养基加热和灭菌不当，可能会引起颜色变化、透明度降低和PH值变化。因此，培养基应通过已验证的灭菌程序进行灭菌，培养基的灭菌方法和条件应通过适用性试验进行验证。此外，应验证高压釜的蒸汽循环系统，以确保在某一装载模式下正常的热量分配。温度缓慢升高的高压灭菌器可能导致培养基过热，过度灭菌可能破坏大多数细菌和真菌培养基的促生质量。灭菌器中培养基的体积和装载方式也会影响加热速度。因此，应根据灭菌介质的特性对灭菌程序进行全面验证。

根据培养基的特性，按照既定的方法进行配制和灭菌，根据验证结果判断是否符合验证标准。如果是，按照验证方法和条件配制培养基并灭菌；如果没有，重新制定计划，再次验证，直到验证结果符合既定的验证标准。

4.2验证项目和认可标准

表1验证项目和认可标准

5.验证使用的仪器和培养基。

5.1实验仪器

表2实验仪器表

5.2培养基和试剂

表3培养基和试剂表

6.核实内容

制备三批相同批次的谢弗氏葡萄糖琼脂培养基用于以下验证。

6.1准备过程

称重

取65.0克谢弗氏葡萄糖液体培养基，加入1000毫升纯化水，加热煮沸至完全溶解。每次按照这个处方准备1000ml。

6.1.2灭菌前pH值的测定

取100ml配制好的谢弗氏葡萄糖液体培养基，冷却至25测定pH值，用适量1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节至5.4 ~ 5.8。

表4灭菌前pH值测量结果

检查者/日期：检查者/日期：

包装

将pH值已确定的谢弗氏葡萄糖液体培养基分装到试管中，分装管数为25管，用牛皮纸捆扎，5管/捆。对于灭菌后的最终pH测量，一个试管仅填充约20ml。

6.2消毒

6.2.1灭菌锅中培养基的数量和装载方式(满载)。

将包装好的5捆(5支/捆)培养基试管放入灭菌锅中，如下图所示放置。

字母表

消毒锅

特拉华州

生物指示剂的放置：放置5个嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂(细菌浓度：5

将装有舍费尔氏葡萄糖的液体培养基在121灭菌15分钟。灭菌后，记录每个温度计点的温度。同时取出5个灭菌后的嗜热脂肪芽孢杆菌，垂直放入夹子中，直到塑料管底部完全稳定。用手指按压夹子上部夹住内玻璃管，吸附有孢子的纸片与培养液接触，57垂直培养48小时。另取无菌嗜热脂肪芽孢杆菌指示剂一起培养作为阳性对照。

根据颜色判断灭菌效果，培养后均保持紫色灭菌合格。如果由紫色变为黄色，则不合格。为了使指示器有效，控制管应该从紫色变为黄色。

6.2.2生物指标培养结果

表5生物指示剂培养结果表

检查者/日期：检查者/日期：

6.2.3保留一些温度计的温度记录。

6.留下一些温度计的温度记录。

检查者/日期：检查者/日期：

6.2.4灭菌后pH值的测定

取20ml无菌谢弗氏葡萄糖液体培养基，冷却至25测定pH值，用适量1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠调节至5.4 ~ 5.8。

表7灭菌后pH值测定结果

检查者/日期：检查者/日期：

6.2.5灭菌后外观

灭菌后，应仔细检查培养基的外观。如有裂缝、颜色异常(正常为黄色)、棉条被培养基污染等。被发现，他们应该被挑选出来并丢弃。

贮存介质发生颜色变化和混浊；如果固体培养基表面出现裂纹或波纹，不符合要求，应停止使用，并重新验证制备和灭菌程序。

表8灭菌后外观性状的结果

检查者/日期：检查者/日期：

7.灭菌后的适用性检查

7.1灭菌后，检查培养基的灵敏度。

见《沙氏葡萄糖液体培养基适用性检查》；055-79000结果符合规定。

7.2灭菌后培养基的无菌检查

见《计数培养基适用性检查记录》，结果符合要求。

8.有效期验证保证

8.1储存三周后的外观形状

表9保存三周后外观特征的结果

检查者/日期：检查者/日期：

8.2保存灵敏度测试结果三周。

见《培养基灭菌后无菌检查记录》；055-79000结果符合规定。

8.3保持三周进行无菌试验。

见《沙氏葡萄糖液体培养基适用性检查》，结果符合要求。

9、

建议、结果分析和验证总结

9.1加强检验人员的操作技能培训，使培养基的配制和灭菌过程规范化、程序化。

9.2当对Shabbutz葡萄糖液体培养基进行日常微生物限度检测时，应检查其外观。不符合要求的，严禁使用，应复水灭菌。

9.3结果分析和验证总结

根据上述验证过程和结果分析，本实验室对培养基的配制和灭菌程序进行了验证，验证结果符合2015年第四版《计数培养基适用性检查记录》、1105 《培养基灭菌后保存三周无菌检查记录》和1106 《中华人民共和国药典》的要求，其使用期限为三周。用于制备沙布茨葡萄糖的日常液体培养基的制备和灭菌通过该验证程序进行。

9.4.重新验证周期

根据2015版《微生物计数法》、1105 《控制菌检查法》和1106 《中华人民共和国药典》的要求，在重新购买沙布茨葡萄糖液体培养基或更换培养基生产厂家或更改配制和灭菌程序时，应再次验证培养基的配制和灭菌程序。

谢弗葡萄糖液

培养

基础

以及制备和灭菌验证。

当然不一样。每个医院的医疗水平也不一样。最好选择知名医院做试管。成功率与年龄、身体状况、精子和卵泡质量、医院医疗水平有关。

同级医院成功率都差不多。我觉得跟一个医院的态度有很大关系。有的医院医生不负责，所以成功率肯定比较低。